fa اثر مهاری پروتئین‌های مهارکننده پلی گالاکتوروناز لوبیا بر آنزیم پلی گالاکتوروناز قارچ‌های بیماری‌زای <i>Fusarium oxysporum</i> و <i>Ascochyta rabiei</i> گیاه نخود عمومی Ggeneral پژوهشي Research قارچ‌های بیماری‌زا به منظور نفوذ به بافت گیاهی از آنزیم‌های پلی گالاکتورونازی استفاده می‌کنند. در مقابل، برخی از گیاهان واجد پروتئین‌های مهار کننده پلی گالاکتوروناز (Polygalacturonase-Inhibiting Proteins/ PGIP) می‌باشند که عملکرد این گلیکو پروتئین‌ها به تأخیر انداختن نفوذ هیف آن و در نتیجه عدم کلونیزاسیون قارچی می‌باشد. در این تحقیق PGIP از هیپوکتیل واریته‌های درخشان و ناز لوبیا (<em>Phaseolus vulgaris</em>) استخراج شد. سپس به روش کروماتوگرافی جذبی با استفاده از آنزیم پلی گالاکتوروناز به‌عنوان لیگاند اختصاصی، تخلیص گردید. خلوص محصول با روش SDS-PAGE مورد بررسی قرار گرفت و مشخص شد که حاوی سه باند پروتئینی در محدوده 47-45 کیلو دالتونی بود. نتایج خالص‌سازی نشان داد که محصول به‌دست آمده از کرماتوگرافی جذبی از خلوص نسبتاَ بالایی برخوردار می‌باشد. هم‌چنین بازده خالص‌سازی P‏GIP با استفاده از کروماتوگرافی جذبی به میزان 68/1 میلی‌گرم PGIP به ازای 100 گرم هیپوکتیل تازه لوبیا می‌باشد. اثر مهاری پروتئین‌های تخلیص شده بر آنزیم پلی گالاکتوروناز جدایه‌های بیماری‌زای <em>Fusarium oxysporum</em> (جدایه F15) و <em>Ascochyta rabiei</em> (جدایه IK04) بررسی شد. پروتئین‌های استخراج شده از هیپوکتیل واریته‌های ناز و درخشان قبل از خالص‌سازی به ترتیب معادل 18 و 28 واحد فعالیت مهار کنندگی بر آنزیم پلی گالاکتوروناز قارچ <em>Fusarium oxysporum</em> از خود نشان می‌دادند در صورتی‌که این میزان مهار کنندگی پس از خالص‌سازی ، هر کدام به 40 واحد افزایش یافت. هم‌چنین فعالیت مهار کنندگی PGIP از این دو واریته بر آنزیم پلی گالاکتوروناز قارچ <em>Ascochyta rabiei</em> قبل از خالص‌سازی هر کدام به میزان 9 واحد بوده و پس از خالص‌سازی این میزان مهار کنندگی به ترتیب به 18 و 29 واحد افزایش می‌یابد. Plant pathogenic microorganisms produce a variety of enzymes capable of degrading different polysaccharides of the plant cell walls. Pathogens use these enzymes to penetrate and colonize host cells. Polygalacturonases are thought to be the first cell wall-degrading enzymes secreted by pathogens when they grow on plant cell walls. Oligogalacturonic acids with the polymerization degrees of 10 to 13 are intermediate products of pectin degradation by the action of polygalacturonases and are known to activate plant defense responses. PG- inhibiting proteins (PGIPs) present in the cell wall of many plants increase the stability of oligogalacturonic acids in the tissues by modulating fungal PG activities. These glycoproteins of the plant cell extracellular matrix retard the advancement of fungal hyphae, reduce tissue maceration, and prevent colonization of pathogen. In this study, <em>Phaseolus vulgaris</em> PGIPs were extracted from hypocotyle of Derakhshan and Naz bean cultivars. PvPGIPs were purified by afinity chromatography and analyzed by SDS-PAGE. Three major bands in the range of 47-55 kDa were detected. Average yield of The affinity-purified PGIPs was 1.68 mg per 100 gram of fresh bean hypocotyle. The inhibitory effect of PGIP was assayed on the PG activities of highly virulent isolates of <em>Fusarium oxysporum</em> (F15) and <em>Ascochyta rabiei</em> (IK04). The inhibitory activity of crude PGIP from Naz and Derakhshan cultivars on polygalacturonase activity of <em>F. oxysporum</em> was 18 and 28 units, respectively. These inhibitory activities increased to 40 units after purification. The inhibitory effect of crude PGIPs from both these two cultivars on PG activity of A. rabiei was 9 units, while purified PGIPs inhibited this PG activity to 18 and 29 units, respectively. پروتئین مهارکننده آنزیم پلی گالاکتوروناز، لوبیا (Phaseolus vulgaris)، کروماتوگرافی جذبی، Fusarium Oxysporum، Ascochyta rabiei Polygalacturonase-inhibiting protein (PGIP), Bean (Phaseolus vulgaris ), Purification, Affinity Chromatography, Fusarium Oxysporum, Ascochyta rabiei 345 356 http://jstnar.iut.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-749&slc_lang=fa&sid=1 A. Hosseinzadeh Colagar اباصلت حسین زاده کلاگر Yes A. Mostafaie علی مصطفایی No M. Motallebi مصطفی مطلبی No M.R. Zamani محمدرضا زمانی No