Journal of Water and Soil Science
علوم آب و خاک
jwss
Agriculture
http://jstnar.iut.ac.ir
0
user
2476-3594
2476-5554
10.47176/jwss
fa
jalali
1383
4
1
gregorian
2004
7
1
8
2
online
1
fulltext
fa
بررسی تغییرات کمّی و کیفی میزان پروتئین، کلروفیل و کاروتنوئید در کلزای تراریخت شده با آنتی سنس ژن گلوتامین سنتتاز (GS1)
Qualitative and Quantitative Variations in Protein, Chlorophyll and Carotenoid Contents in<i> Brassica napus</i> Transformed by Antisense Glutamine Synthefase
عمومی
Ggeneral
پژوهشي
Research
بررسی گیاهان تراریخت در پروژه انتقال ژن، از اهمیت ویژهای برخوردار است. در این پژوهش، نسل دوم (T<sub>1</sub>) گیاهان تراریخت کلزا که ژن گلوتامین سنتتاز در جهت آنتیسنس به آنها منتقل شده بود، مورد بررسی قرار گرفت. میزان پروتئین کل محلول برگ و مقدارکلروفیلهای a ، b و کاروتنوئید، با استفاده از روش اسپکتروفوتومتری و معادلات مربوطه تعیین شد. میزان کمی پروتئین در برگهای کلزا در مراحل مختلف رشدی گیاه و تیمارهای مختلف بررسی شد که در مرحله قبل از گلدهی (MG1) شروع به افزایش نموده و در زمان گلدهی (MG2) به بیشترین میزان رسید و در مرحله پیری برگ (SS) مقدار پروتئین کل کاهش نشان داد. در مقایسه بین تیمارها، تیمار A2 بیشترین میزان پروتئین و تیمار A6 کمترین مقدار را نشان دادند. از نظرمیزان کلروفیلهای a وb بین تیمارهای مورد مطالعه اختلاف معنیداری مشاهده نشد ولی بین مراحل مختلف رشد کلزا تفاوت معنی دار بوده و مرحله MG2 بیشترین و SS کمترین میزان کلروفیلهای a و b را نشان دادند. بهمنظور مطالعه الگوهای باندی در پروتئینهای استخراج شده از گیاهان تراریخت در مقایسه با گیاه شاهد از روش اس.دی.اس.پیج استفاده شد که در مقایسه الگوهای باندی حاصل از مرحله MG1 تفاوت قابل ملاحظهای بین باندها دیده نشد، ولی در باندهای حاصل از مراحل MG2 و YG تفاوتهایی مشاهده شد. در مرحله YG اختلاف بین تیمارهای A5 ، A3 ، A4 و A6 با شاهد در موقعیت وزنی 41 کیلو دالتون و بین تیمارهای A1 و A2 با تیمار شاهد در موقعیت 6/23 کیلو دالتون مشاهده گردید. در مورد باندهای حاصل از مرحله MG2 نیز بین تیمارهای A1، A3، A4 و A6 با تیمار شاهد در موقعیت وزنی57 کیلو دالتون اختلافاتی وجود داشت. با توجه به اینکه کلیه شرایط برای رشد، استخراج پروتئین و آنالیز ماکرومولکولها در گیاهان تراریخت و شاهد کاملاً کنترل شده و مشابه بوده است، در نتیجه میتوان احتمال داد که تفاوتهای مشاهده شده در گیاهان تراریخت نسبت به گیاهان شاهد به دلیل اثر آنتیسنس ژن گلوتامین سنتتاز می باشد.
Analysis of transgenic plants is very important in gene transfer programs. In this research, the second generation (T<sub>1</sub>) of transgenic <em>brassica</em> <em>napus</em> which was transformed by antisense of Glutamine synthetase (GS) gene was studied from the view of total soluble protein content of leaf, total chlorophyll and protein patterns (SDS-PAGE) using seeds of <em>Brassica napus</em> .Protein concentration was determined by a calorimetric method described by Bradford method. Chlorophyll (a, b) and carotenoid contents were determined by spectrophotometry. The total soluble protein content of Brassica napus leaves increased from YG stage, reached a maximum level during MG<sub>2</sub> and, after this, decreased with the progress of SS stage. Comparison of the total soluble protein between different treatments showed the highest level in the A<sub>2</sub> plant and the least in the A<sub>6</sub> plant. Comparisons with chlorophyll a and b were not significant between different treatments, but different stages showed significant differences with maximum and minimum levels obtained in the MG<sub>1</sub> and SS, respectively. Protein patterns were also studied using SDS-PAGE method. No new band was recognized in the MG<sub>1</sub> stage, but the density of some protein patterns was shown in YG and MG<sub>2</sub> stages. In YG stage, differences were seen among the A<sub>5</sub>, A<sub>3</sub>, A<sub>4</sub> and A<sub>6</sub> with W.T on 41 KDa weighty position and also between the A<sub>1 </sub>and A<sub>2</sub> with W.T treatment on 23/6 KDa. Considering the molecular weight GS<sub>1</sub> subunit of glutamine synthetase (41 KDa) and the similar conditions in growth, protein extraction and macro molecular analysis in transgenic and control plants, we can tell that the difference shown in transgenic plants are probably due to the effect of the antisense of glutamine synthesis gene in this plant.
ژن گلوتامین سنتتاز، پروتئین، کلروفیل، آنتی سنس، تراریخته، کلزا
Gelutamine synthetase, Antisense, Brassica napus , Transformed plant.
107
120
http://jstnar.iut.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-428&slc_lang=fa&sid=1
M. Jalali Javaran
مختار جلالی جواران
00031947532846005984
00031947532846005984
Yes
H. Hashemzadeh
حمید هاشم زاده
00031947532846005985
00031947532846005985
No
A. Mousavi
امیر موسوی
00031947532846005986
00031947532846005986
No